La vitrificación de ovocitos es una técnica clave en los programas de reproducción asistida, permitiendo preservar la fertilidad con altos niveles de eficacia. Sin embargo, una de las preguntas más frecuentes en la práctica clínica es si el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido puede afectar la calidad y el potencial reproductivo de los ovocitos. A partir de la evidencia científica disponible, que incluye estudios observacionales y revisiones sistemáticas recientes, este artículo analiza el impacto del almacenamiento prolongado sobre los principales resultados biológicos y clínicos, desde la supervivencia ovocitaria hasta el nacimiento vivo.
¿Qué técnicas existen para la congelación de ovocitos?
Actualmente existen dos métodos principales para la criopreservación de ovocitos: la congelación lenta y la vitrificación. La congelación lenta fue la primera técnica utilizada clínicamente y consiste en un descenso controlado y progresivo de la temperatura hasta alcanzar las condiciones de almacenamiento en nitrógeno líquido. Sin embargo, la formación de cristales de hielo durante el proceso puede comprometer la integridad celular del ovocito.
La vitrificación, introducida de forma rutinaria en reproducción asistida a partir de la década del 2000, utiliza altas concentraciones de crioprotectores y velocidades ultrarrápidas de enfriamiento que evitan la formación de hielo intracelular. Gracias a ello, se ha asociado con mayores tasas de supervivencia post-desvitrificación, fecundación y desarrollo embrionario.
¿Son seguras las técnicas actuales de congelación de óvulos?
Sí. Actualmente, la criopreservación de ovocitos es considerada una técnica segura y eficaz para la preservación de la fertilidad. La evidencia acumulada durante las últimas dos décadas ha demostrado que los ovocitos vitrificados mantienen adecuadamente su potencial reproductivo, obteniéndose tasas de embarazo y nacido vivo comparables a las observadas con ovocitos frescos en determinadas poblaciones de pacientes.
Asimismo, múltiples estudios de seguimiento neonatal no han evidenciado un incremento en la incidencia de malformaciones congénitas, alteraciones cromosómicas ni complicaciones obstétricas atribuibles al proceso de criopreservación.
¿Por qué la vitrificación es actualmente la técnica más utilizada para la congelación de ovocitos?
La vitrificación se ha convertido en la técnica de referencia para la criopreservación de ovocitos debido a su superioridad frente a la congelación lenta en los principales indicadores de laboratorio y resultados clínicos. Su principal ventaja radica en la prevención de la formación de cristales de hielo intracelulares, uno de los principales mecanismos de daño celular durante la criopreservación.
Gracias a ello, la vitrificación permite alcanzar tasas de supervivencia post-desvitrificación que habitualmente superan el 85–90 % en centros con experiencia, además de altas tasas de fecundación y desarrollo embrionario. Diversos estudios han demostrado que los embriones obtenidos a partir de ovocitos vitrificados presentan tasas de desarrollo a blastocisto comparables a las observadas con ovocitos frescos.
Por el contrario, la congelación lenta se asocia con menores tasas de supervivencia ovocitaria debido al daño ocasionado por la formación de hielo durante el proceso de enfriamiento. Como consecuencia, la vitrificación ha reemplazado prácticamente por completo a la congelación lenta tanto para ovocitos como para embriones en los laboratorios modernos de reproducción asistida.
¿Qué parámetros permiten evaluar la calidad y viabilidad de los ovocitos congelados?
La congelación de ovocitos, como se ha mencionado anteriormente, es una técnica que ha sido optimizada en los últimos años dentro de los programas de fertilización in vitro. Sin embargo, para determinar si un ovocito descongelado mantiene su calidad y viabilidad, no basta con evaluar su apariencia morfológica, sino que es necesario confirmar que conserva su capacidad funcional para sostener el desarrollo embrionario hasta un nacimiento vivo.
El primer parámetro de evaluación es la supervivencia post-descongelación, entendida como la proporción de ovocitos que mantienen su integridad estructural tras el proceso de calentamiento, incluyendo membrana plasmática intacta, citoplasma sin vacuolización severa y zona pelúcida conservada.
Un segundo parámetro corresponde a la capacidad de fecundación, habitualmente evaluada mediante ICSI, que permite determinar si el ovocito es competente para ser activado y formar un pronúcleo normal, lo cual refleja la funcionalidad del huso meiótico y la integridad del material genético.
Posteriormente, se evalúa la capacidad de desarrollo embrionario, que incluye la división adecuada del embrión en etapas tempranas y, de manera más relevante, la formación de blastocistos de buena calidad.
Finalmente, el parámetro más clínicamente relevante es la tasa de implantación y nacimiento vivo, que integra de forma global la viabilidad del ovocito criopreservado y su capacidad de generar un embarazo exitoso.
¿Qué evidencia científica existe sobre el almacenamiento prolongado de ovocitos?
La principal limitación para responder cuánto tiempo pueden permanecer almacenados los ovocitos en nitrógeno líquido es que la vitrificación ovocitaria es una técnica relativamente reciente. Aunque la criopreservación de ovocitos se inició en la década de 1980, su uso clínico masivo mediante vitrificación se consolidó a partir de mediados de los años 2000.
Por ello, la mayoría de estudios disponibles evalúan periodos inferiores a 10 años. No obstante, investigaciones recientes han ampliado esta evidencia con seguimientos más prolongados.
Uno de los estudios más relevantes es el de Roger y colaboradores, quienes analizaron más de 5.000 ovocitos vitrificados en diferentes intervalos de almacenamiento (0–2, 3–5 y 6–11 años), evaluando supervivencia, fecundación, desarrollo embrionario, implantación y embarazo clínico, sin encontrar diferencias significativas relacionadas con el tiempo de criopreservación.
De forma complementaria, Kauffman y colaboradores publicaron en 2025 una revisión sistemática con metanálisis que incluyó estudios con más de 10 años de almacenamiento, evaluando resultados como implantación, embarazo clínico y nacido vivo.
En conjunto, la evidencia disponible sugiere que el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido no parece afectar de manera significativa el potencial reproductivo de los ovocitos vitrificados dentro de los periodos estudiados.
¿Afecta el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido a la supervivencia de los ovocitos tras la desvitrificación?
La supervivencia de los ovocitos es un parámetro crítico para evaluar su calidad tras la desvitrificación. La evidencia disponible indica que el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido no tendría un impacto significativo en este desenlace.
En el estudio de Roger y colaboradores, realizado en mujeres que criopreservaron su fertilidad por indicación no médica, los ovocitos vitrificados fueron analizados según distintos periodos de almacenamiento (0 a 11 años). Tras el ajuste por variables como edad materna, índice de masa corporal y recuento de folículos antrales, no se encontraron diferencias significativas en las tasas de supervivencia entre los grupos como se puede evidenciar en la imagen siguiente.
Figura 1. Tabla de regresión logística multivariada de tasa de supervivencia, fertilización y blastulación.
Fuente: Duration of cryostorage is not associated with rates of thaw survival, fertilization, blastulation and ploidy, or pregnancy outcomes of vitrified human oocytes
De manera consistente, la revisión sistemática y metanálisis de Kauffman et al. (2025) encontró resultados similares, incluso al comparar periodos de almacenamiento mayores o menores a 10 años, sin evidenciar un efecto negativo del tiempo de criopreservación sobre la supervivencia ovocitaria.
¿El tiempo de almacenamiento de los ovocitos en nitrógeno líquido afecta la fecundación y la calidad embrionaria?
La tasa de fecundación y la capacidad de los ovocitos para generar embriones de buena calidad son dos de los parámetros más importantes en reproducción asistida, ya que reflejan tanto la competencia funcional del ovocito como su potencial de desarrollo tras la fecundación.
La evidencia disponible indica que el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido no influye de manera significativa en ninguno de estos dos desenlaces. Tanto el estudio de Roger y colaboradores como la revisión sistemática y metanálisis de Kauffman et al. muestran tasas de fecundación y de desarrollo embrionario comparables entre ovocitos vitrificados por distintos periodos de tiempo.
En particular, el análisis de Kauffman et al. incluye casos con más de 10 años de almacenamiento, sin observar diferencias relevantes en la fecundación ni en la formación de blastocistos o la calidad embrionaria. Aunque parte de la evidencia proviene de estudios observacionales o series pequeñas, la tendencia global es consistente con los resultados obtenidos en periodos más cortos.
En conjunto, los datos actuales sugieren que el tiempo de criopreservación no compromete ni la capacidad de fecundación ni el potencial embrionario de los ovocitos vitrificados, siempre que el proceso de vitrificación y el manejo en laboratorio sean adecuados.
Figura 1. Tabla de regresión logística multivariada de tasa de supervivencia, fertilización y blastulación.
Fuente: Duration of cryostorage is not associated with rates of thaw survival, fertilization, blastulation and ploidy, or pregnancy outcomes of vitrified human oocytes
¿El tiempo de almacenamiento de los ovocitos vitrificados influye en la implantación, el embarazo clínico y el nacido vivo?
La tasa de implantación embrionaria, el embarazo clínico y el nacimiento vivo representan los principales desenlaces clínicos en reproducción asistida, ya que permiten evaluar de forma integral la eficacia del tratamiento desde la transferencia embrionaria hasta el resultado final.
La evidencia disponible indica de manera consistente que el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido no influye significativamente en ninguno de estos resultados. La revisión sistemática y metanálisis de Kauffman et al. no encontró diferencias en las tasas de implantación al comparar periodos de almacenamiento cortos y prolongados, utilizando como punto de corte los 10 años.
De forma similar, los estudios y metanálisis analizados muestran que las tasas de embarazo clínico son comparables independientemente del tiempo de criopreservación, sin diferencias significativas entre ovocitos almacenados por periodos cortos o prolongados.
Finalmente, los datos disponibles también indican que la tasa de recién nacido vivo no se ve afectada por el tiempo de almacenamiento, manteniéndose estable incluso tras largos periodos de vitrificación.
En conjunto, la evidencia actual sugiere que la criopreservación prolongada no compromete la capacidad de los ovocitos vitrificados para generar implantación, embarazo clínico ni nacimiento vivo, siempre que el proceso de vitrificación y el manejo en laboratorio sean adecuados.
Figura 2. Tabla de comparación de resultados embriológicos y reproductivos entre casos individuales de pacientes con crioalmacén por menos de 10 años (N=5) comparado con crioalmacenamiento por más de 10 años (N=11).
Fuente: Effect of prolonged oocyte cryopreservation for >10years on reproductive outcomes – a systematic review and meta-analysis
El almacenamiento prolongado de ovocitos incrementa el riesgo de aneuploidías embrionarias?
La evidencia disponible indica que el tiempo de almacenamiento en nitrógeno líquido no incrementa el riesgo de alteraciones genéticas en los embriones derivados de ovocitos vitrificados.
En el estudio de Roger y colaboradores, que evaluó ovocitos almacenados hasta por 11 años, no se encontraron diferencias en variables genéticas embrionarias, incluyendo la tasa de aneuploidías, mosaicismo ni el porcentaje global de embriones aneuploides entre los distintos periodos de almacenamiento.
Estos hallazgos sugieren que la vitrificación ovocitaria no se asocia a un aumento del riesgo genético embrionario, incluso tras periodos prolongados de criopreservación.
Figura 3. Tabla de datos de criopreservación de ovocitos y desarrollo embrionario
Fuente: Duration of cryostorage is not associated with rates of thaw survival, fertilization, blastulation and ploidy, or pregnancy outcomes of vitrified human oocytes
¿Cuál es el tiempo máximo de almacenamiento de ovocitos reportado en la literatura científica con nacimientos exitosos?
La evidencia científica disponible muestra que no existe un límite claramente establecido para el tiempo de almacenamiento de ovocitos en nitrógeno líquido cuando las condiciones de criopreservación son adecuadas.
Según la revisión de Kauffman y colaboradores, se han reportado nacimientos vivos a partir de ovocitos vitrificados tras más de 15 años de almacenamiento. Además, más del 60% de los embriones derivados de ovocitos almacenados por más de una década han sido utilizados con éxito para lograr embarazos y nacidos vivos.
Estos hallazgos refuerzan la idea de que el tiempo de criopreservación no compromete la viabilidad clínica de los ovocitos, siempre que el proceso de vitrificación y almacenamiento se haya realizado correctamente.
Conclusión
La evidencia científica disponible hasta la fecha indica de manera consistente que el tiempo de almacenamiento de los ovocitos en nitrógeno líquido no afecta de forma significativa sus principales desenlaces biológicos y clínicos. Parámetros como la supervivencia tras la desvitrificación, la tasa de fecundación, el desarrollo embrionario, la implantación, el embarazo clínico y el nacimiento vivo se mantienen estables incluso tras periodos prolongados de criopreservación.
Los estudios observacionales de gran tamaño y las revisiones sistemáticas recientes, incluyendo seguimientos de hasta más de 10 años e incluso reportes superiores a 15 años, coinciden en que la vitrificación ovocitaria es una técnica altamente estable en el tiempo cuando se realiza bajo condiciones adecuadas.
En conjunto, la evidencia actual sugiere que el factor crítico no es la duración del almacenamiento, sino la calidad del proceso de vitrificación, el manejo en laboratorio y las características biológicas de cada paciente.
BIBLIOGRAFÍA
Roger S., Estevez S., Hernandez-Nieto C. et al. (2025).
Duration of cryostorage is not associated with rates of thaw survival, fertilization, blastulation and ploidy, or pregnancy outcomes of vitrified human oocytes.
Journal of Assisted Reproduction and Genetics.
Disponible en PubMed – Duration of cryostorage and reproductive outcomes 👉 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39753943/
Kauffman A., Karol D., Jones C.A., Li Q., Huszti E., Michaeli J. (2025).
Effect of prolonged oocyte cryopreservation for >10 years on reproductive outcomes: a systematic review and meta-analysis.
Reproductive BioMedicine Online.
Disponible en PubMed – Prolonged oocyte cryopreservation >10 years and reproductive outcomes 👉 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42092266/
